Celem poprawnego przygotowania próbek obejmujących komórki do ekstrakcji RNA prosimy o zastosowanie się do poniższych wytycznych.
Rekomendowana liczba komórek na próbkę: 1 × 10⁷ komórek
1. Komórki adherentne
01Przepłucz komórki adherentne buforem PBS (5 mL, wolnym od RNaz).
02Usuń PBS i dodaj bufor Trizol.
03Użyj pipety, aby pobrać zawiesinę komórkową i rozbić wszelkie widoczne grudki, mieszając do momentu, aż zawiesina stanie się klarowna.
04Przełóż zawiesinę do probówek do wirowania o pojemności 2 mL (wolnych od RNaz).
05Przechowuj probówki w temperaturze -80 °C.
2. Komórki zawiesinowe
01Przepłucz komórki zawiesinowe buforem PBS (1 mL, wolnym od RNaz).
02Przenieś zawiesinę do probówek do wirowania o pojemności 2 mL (wolnych od RNaz).
03Uzyskaj pelet komórkowy poprzez wirowanie przy 3000 g.
04Dodaj bufor Trizol i użyj pipety, aby pobrać zawiesinę oraz rozbić wszelkie widoczne grudki, mieszając do momentu, aż zawiesina stanie się klarowna.
05Przechowuj probówki w temperaturze -80 °C.
3. Inne przypadki
- Dla użytkowników, którzy nie mają dostępu do buforu Trizol, komórki po oczyszczeniu mogą zostać zamrożone metodą "flash-freezing" w ciekłym azocie, a następnie przechowywane w temperaturze -80 °C.
Wysyłka
- Próbki należy zapakować w suchy lód, aby zapewnić stabilność i jakość materiału podczas transportu.
- Szczegóły przygotowania próbek zostały opisane tutaj.
POWIĄZANE ARTYKUŁY
Izolacja DNA lub RNAZalecenia do przygotowania próbek do wysyłkiTypy próbekWymagania dotyczące próbek - DNA/RNAWymagania dotyczące próbek - TKANKIPróbki krwi pełnejSŁOWA KLUCZOWE
izolacja RNARNA z komórekkomórki adherentnekomórki zawiesinoweTrizolPBSekstrakcja RNAhodowla komórkowaRNA extraction
Czy ten artykuł był pomocny?
Twoja odpowiedź pomaga nam poprawiać bazę wiedzy.
Dziękujemy - to nam pomaga.
Dziękujemy. Czego zabrakło?
Jedno zdanie wystarczy - trafi do osoby, która prowadzi ten artykuł.
Dziękujemy za uwagę.