Pro správnou přípravu buněčných vzorků k extrakci RNA postupujte prosím podle následujících pokynů.
Doporučený počet buněk na vzorek: 1 × 10⁷ buněk
1. Adherentní buňky
01Promyjte adherentní buňky pufrem PBS (5 mL, bez RNáz).
02Odstraňte PBS a přidejte pufr Trizol.
03Naberte buněčnou suspenzi pipetou a opakovaným pipetováním rozrušte všechny viditelné shluky, dokud nebude suspenze čirá.
04Přeneste suspenzi do centrifugačních zkumavek o objemu 2 mL (bez RNáz).
05Zkumavky skladujte při teplotě -80 °C.
2. Suspenzní buňky
01Promyjte suspenzní buňky pufrem PBS (1 mL, bez RNáz).
02Přeneste suspenzi do centrifugačních zkumavek o objemu 2 mL (bez RNáz).
03Získejte buněčný pelet centrifugací při 3000 g.
04Přidejte pufr Trizol, naberte suspenzi pipetou a opakovaným pipetováním rozrušte všechny viditelné shluky, dokud nebude suspenze čirá.
05Zkumavky skladujte při teplotě -80 °C.
3. Další případy
- Pokud nemáte k dispozici pufr Trizol, lze buňky po přečištění prudce zmrazit metodou „flash-freezing“ v kapalném dusíku a následně skladovat při teplotě -80 °C.
Odeslání
- Vzorky je nutné zabalit do suchého ledu, aby byla zajištěna stabilita a kvalita materiálu během přepravy.
- Podrobnosti o přípravě vzorků jsou popsány zde.
SOUVISEJÍCÍ ČLÁNKY
Izolace DNA nebo RNAV jakém pufru přepravovat buňky po třídění metodou FACS pro analýzy RNA?Doporučení pro přípravu vzorků k odesláníTypy vzorkůPožadavky na vzorky - DNA/RNAPožadavky na vzorky - TKÁNĚKLÍČOVÁ SLOVA
izolace RNARNA z buněkadherentní buňkysuspenzní buňkyTrizolPBSextrakce RNAbuněčná kulturaextrakce RNA
Byl vám tento článek užitečný?
Vaše odpověď nám pomáhá zlepšovat znalostní bázi.
Děkujeme - pomáhá nám to.
Děkujeme. Co chybělo?
Stačí jedna věta - dostane se k osobě, která má tento článek na starosti.
Děkujeme za připomínku.