Whole Bacterial / Fungal Genome Sequencing je pokročilá metoda sekvenování, která umožňuje určit úplnou sekvenci genomu organismu. Tato technika umožňuje analýzu veškeré DNA.
Průběh procesu Bacterial/Fungal WGS

Využití Bacterial/Fungal WGS
- Identifikace patogenů způsobujících bakteriální infekce.
- Analýza rezistence vůči antibiotikům (např. detekce genů rezistence, jako jsou bla, mecA, van).
- Charakterizace bakteriálních kmenů s cílem určit jejich patogenní potenciál.
- Diagnostika houbových patogenů (např. Candida albicans, Aspergillus fumigatus). Analýza kmenů rezistentních vůči antimykotikům.
- Sledování zdrojů nákazy při vypuknutí epidemií (např. Salmonella, E. coli, Listeria).
- Určování genetické příbuznosti mezi kmeny v čase a prostoru.
- Analýza příbuznosti houbových kmenů v ohniscích nemocničních infekcí a infekcí z prostředí.
- Charakterizace nových druhů bakterií a jejich genomů.
- Porozumění adaptačním mechanismům, např. v prostředí nebo pod vlivem antibiotik.
- Porozumění biologii hub, např. životnímu cyklu a mechanismům patogeneze. Výzkum genů odpovědných za produkci sekundárních metabolitů (např. antibiotik).
- Monitorování bakterií v potravinovém dodavatelském řetězci (např. detekce patogenních bakterií v potravinářském průmyslu).
- Kontrola kvality a sledování kmenů způsobujících kontaminaci výrobků.
- Detekce hub produkujících mykotoxiny v potravinách a krmivech (např. Aspergillus produkující aflatoxiny).
- Analýza bakterií patogenních pro hospodářská zvířata.
- Výzkum půdního mikrobiomu a vlivu bakterií na výnosy plodin.
- Analýza houbových patogenů rostlin (např. Fusarium, Phytophthora).
- Výzkum symbiotických hub zlepšujících zdraví rostlin.
- Výzkum rozmanitosti mikroorganismů v ekosystémech.
- Analýza úlohy bakterií v biotechnologických procesech (např. dekontaminace životního prostředí).
- Využití ve farmaceutickém průmyslu (např. produkce penicilinu houbami rodu Penicillium), v potravinářství (fermentace) či při výrobě biopaliv (např. celulolytické enzymy).
- Analýza úlohy hub v koloběhu látek, např. při rozkladu biomasy, a v bioremediaci.
Technická charakteristika Bacterial/Fungal WGS
- Režim sekvenování:
- Illumina: 2 × 150 bp
- ONT: 20 kb
- PacBio Revio: 10 kb-HiFi
- Doporučená hloubka pokrytí genomu / množství dat na vzorek:
- Bacterial WGS
- Illumina (pracovní sestava genomu): 100 X
- Nanopore: ≥ 100X ONT + 100X Illumina - kompletní sestava genomu 0-Gap
- PacBio: 30X HiFi + 100X Illumina - kompletní sestava genomu 0-Gap
- Fungal WGS
- Illumina: 100X (Orientační analýza: 50X)
- Nanopore: ≥ 100X ONT + 50X Illumina
- PacBio: 30X HiFi + 50X Illumina
- Bacterial WGS
Požadavky na vzorky
Minimální požadavky na vzorky (Illumina):
- Typ vzorku: gDNA
- Množství: > 60 ng
- Koncentrace (NanoDrop): >1 ng/μL
- Objem: >20 μL
Minimální požadavky na vzorky (PacBio):
- Typ vzorku: gDNA
- Množství: > 2 μg
- Koncentrace (NanoDrop): >20 ng/μL
- Objem: >20 μL
Minimální požadavky na vzorky (ONT):
- Typ vzorku: gDNA
- Množství: > 2 μg
- Koncentrace (NanoDrop): >50 ng/μL
- Objem: >20 μL
Doporučujeme zaslat vzorek ve větším množství / vyšší koncentraci, než je požadované minimum.
Z dodaných vzorků je možná také izolace DNA. Podrobnosti zde.
Bioinformatická analýza Bacterial/Fungal WGS
- Celogenomové resekvenování hub (WGS):
- Detekce jednonukleotidových polymorfismů (SNP).
- Sestavování genomu de novo:
ROZSAH BIOINFORMATICKÉ ANALÝZY3 analýzyAnalýza genomu hub/bakterií (Illumina) Odhad velikosti genomu.Pracovní sestava genomu hub/bakterií (Illumina) Analýza složek genomu a anotace funkcí.Přesně sestavený genom hub/bakterií (Illumina + ONT/PacBio) Analýza složek genomu a anotace funkcí. Bakterie - vizualizace genomu pomocí diagramu Circos.
Ukázkové obrázky

Vybrané realizované projekty a publikace našich zákazníků
Podívejte se, pro které instituce provádíme sekvenování NGS a v jakých publikacích byla využita námi dodaná data.
